血液分析仪的应用不但提高了检测结果的准确性和工作效率，而且为临床提供了更多更有用的实验指标。目前血液分析仪的应用已较普及，为了便于实验室更好地使用和选购仪器，本文着重介绍了血液分析仪的研究进展，国内大、中型医院使用仪器的现状，仪器使用过程中应注意的一些问题及实验室在选择仪器时应考虑的问题等内容，供同道们参考。

一 血液分析仪的应用进展

    早期的血液分析仪采用电容法和光电法的原理对细胞进行计数，仅可测定红、白细胞两项参数，且测定结果易受多种干扰因素的影响。1948年Coulter先生发明阻抗原理后，血液分析仪测定结果的精密度和准确性得到了提高。阻抗原理通过测量细胞的体积大小对细胞进行分类计数，由于无法对细胞的内部结构进行分析，决定了用该原理设计的分析仪只能测定白细胞的二项和三项分类。80年代以后，激光技术开始用于血液分析仪，激光是稳定性很强的单色光源，能对细胞内部核的形态和颗粒进行检测，采用激光法和阻抗法相结合的原理，可以做白细胞五项分类的测定，如美国雅培公司生产的CELL-DYN 3500型仪器。80年代中期，美国库尔特公司用电阻法(测量细胞大小)、激光法(测量细胞核的形态)和高能电磁波技术(检测细胞内颗粒的大小和密度)联合检测一个细胞，通过数据的综合分析进行细胞分类，如Coulter MAXM 型血液分析仪。90年代德国拜耳公司推出的Tech-nicon H.3型仪器采用细胞化学反应与激光技术相结合的原理对白细胞进行五分类检测，由于中性粒细胞浆内含丰富的过氧化物酶，单核细胞次之，原始细胞极少，淋巴和嗜碱性粒细胞缺乏此酶，仪器可通过过氧化物酶通道和嗜碱/分叶核通道对细胞进行分类，同时采用流式细胞分析技术对网织红细胞进行计数和分类。为了防止氰化物对环境的污染，日本东亚公司继生产K-1000型仪器之后，测定血红蛋白已不用氰化高铁血红蛋白法，而用月桂酰硫酸钠血红蛋白法(SLS-Hb法)，该方法的优点为试剂无毒性、不污染环境，又不失HiCN法的正确性，不足之处是目前尚无SLS-Hb的稳定校准品。东亚公司的SE 9000型仪器还可识别幼稚细胞，主要是根据幼稚细胞与成熟细胞膜上脂质含量的多少不同，细胞膜对硫化氨基酸结合量的不同，在加入溶血剂后对细胞膜的保护能力不同的原理对幼稚细胞进行检测。为了对网织红细胞进行准确的计数和分类，东亚公司研制出了R-3000网织红细胞分析仪，该仪器利用流式细胞检测原理，用荧光染料对网织红细胞进行染色，经氩激光照射单个排列的细胞后，据散射光强度和荧光强度对网织红细胞进行计数和分类，该仪器可直接检测网织红细胞，标本不需预处理。此外，雅培公司生产的CD-4000、CD-3500仪器以及库尔特公司生产的GEN.S、MAXM 仪器也可检测网织红细胞。一些高档仪器还可计数CD4和CD8淋巴细胞，如Coulter GEN.S HE和Technicon H.3等仪器。随着电子计算机和多项高新技术的联合应用，仪器检测的参数不断增多，结果的准确性也大大提高。90年代以来，发达国家逐渐淘汰了半自动血液分析仪而采用全自动仪器，甚至将几种仪器联合在一起，由电脑控制操作。如日本东亚公司的HST系列将S系列血液分析仪，R-3000网织红细胞分析仪及自动血涂片制备系统组装在一起，加上智能传送装置，以完成血液测定、涂片和染色的全自动化。美国库尔特公司和雅培公司也都有各自的全自动检测系统。血液学检测的全自动系统还可与生化、免疫的检测系统进行组合，大大提高了标本的检测速度。

二 血液分析仪在国内使用情况

    国产的血液分析仪由于技术原因仅能测定血红蛋白、白细胞和红细胞三项参数。80年代以来，国内使用的血液分析仪主要依赖进口，最初引进的仪器多是价格较低、测定参数少的半自动血液分析仪，且数量较少。随着国内经济发展水平的提高，引进的仪器数量大大增加，主要仍以二分类和三分类的仪器为主。近两年来在北京、上海和广东等地的一些大医院购进了五分类的高档血液分析仪，提高了国内血液分析仪使用的档次。

    为了了解血液分析仪的使用情况，我们对1999年参加全国血液学室间质评的实验室所使用的仪器种类和数目进行了统计分析。473个实验室所用仪器的分布状况见表1。

    表1的数据表明，国内目前大、中型医院使用的血液分析仪主要以Coul-ter、Sysmex、和CELL-DYN三个系列为主，各系列中占比例最多的型号以中低档血液分析仪为主。

三 血液分析仪使用过程中应注意的一些问题

 

1. 仪器与试剂的配套问题

       目前国内使用的血液分析仪绝大部分为进口仪器，由于仪器的测定原理不完全相同，故与仪器配套使用的试剂也不同，甚至同一厂家生产的相同系列不同型号的仪器使用的试剂都不同。仪器与配套的试剂、配套的校准物、质控物和一定的操作方法组成了一个系统，校准物和质控物的定值以及仪器各种性能指标的制定都是在这个系统下完成的，如果要用自配试剂替代配套试剂，则须经有关机构进行质量检定，但由于部分国产试剂批与批之间的差别较大，致使检定合格的试剂也不一定能保证测定结果的准确性，故对于有条件的实验室，最好使用仪器生产厂家推荐使用的配套试剂。

2. 仪器校准的问题

       有一些实验室从未校准过仪器或错误地用库尔特4C质控物或国产“定值”质控物校准各种不同型号的血液分析仪。为了比较不同方法校准血液分析仪后新鲜血全血细胞计数测定结果的差别，我们用配套校准物，非配套校准物和质控物分别在四台仪器上进行仪器校准后，再比较5份新鲜血在各仪器上全血细胞计数(CBC)测定结果的可比性和偏差。结果表明，用配套校准物校准后仪器测定新鲜血的CBC结果非常接近，用非配套校准物或质控物校准仪器后，新鲜血的WBC、Plt和Hct的偏差明显增大，但用不同的物质校准仪器时偏差增大的程度不同。故在校准血液分析仪时，我们建议有条件的实验室用仪器生产厂家推荐使用的配套校准物或取新鲜血直接用参考方法校准血红蛋白和压积参数。对于使用无配套校准物仪器的实验室可取新鲜血用经配套校准物校准后的仪器(最好是使用配套试剂，正确开展室内质控的仪器)定值后，将定值的新鲜血作为校准物进行仪器校准。

3. 室内质控的有关问题

       室内质控的目的是保证测定结果的重复性，只有在测定结果相对稳定的情况下校准仪器才是有意义的，故开展室内质控是进行仪器校准和参加室间质评的前提。到1999年为止，参加全国全血细胞计数室间质评的实验室基本上都开展了Hb、Plt和WBC测定的室内质控，由于受到一些客观条件的限制(如进口全血质控物成本高，保存期短、入关困难，国产全血质控物的技术问题未完全解决等)，部分实验室在开展室内质控时碰到一些困难。建议有条件的实验室使用配套的质控物，对于使用无配套质控物仪器的实验室可选择与仪器原理相匹配的质控物自行定值后开展室内质控。 

4. 室间质评存在的问题

       开展室间质评活动所用的质评物须与常规标本一起在常规工作条件下进行测定，以发现在测定病人标本的过程中存在的问题，但目前部分实验室设定专门的“质控员”给质评物的测定单开小灶的现象及互相核对测定结果的现象仍存在，致使一些质评回报数据无法反映真实情况。另外，在分组进行结果的评价时，对于少数分在“其它组”的仪器测定结果的评价可能存在不客观性，再有所用的质评物可能不适用于某一型号仪器个别参数的测定，致使某一仪器个别参数的测定结果无法进行评价。

5. 仪器的使用应有相应的配套设施

       为了保证测定结果的准确性，仪器所需的配套设施是很重要的。如采血和贮血的专用器具及其它消耗品须合乎要求，稳定的电压、合乎要求的温湿度条件，用于仪器日常维护的试剂及配件等也是很重要的。目前有些实验室购进的仪器档次很高，由于忽略了前述的一些问题导致仪器故障发生率较高或分析前误差增大的情形。 

6. 仪器测定结果的正常参考值

       在使用血液分析仪时，有必要正确理解正常参考值的概念。正常参考值是随着仪器、试剂、年龄、性别以及环境等因素而变化的，实验室人员应掌握确定正常参考值的方法，以根据实际情况确定所在实验室的参考值。

7. 人员的培训

       自动化仪器的原理复杂，仪器说明书多为外文，要求操作者有一定的外文水平、专业知识和计算机操作的基础知识，要求一个实验室至少有1~2个主要操作人员熟练仪器的原理，基本结构、操作方法、仪器的校准、室内质控、日常维护及测定结果影响因素的判断等内容。

   其它操作人员至少应熟练掌握室内质控、基本操作方法和日常维护等内容，切忌简单地认为自动化仪器只要按几个键就可出报告的错误想法。

8. 对仪器的性能参数缺乏评价的问题

       大部分实验室在购买仪器后都未认真地对该仪器的主要性能参数进行过评价。国外的实验室一般是先评价后付款购仪器，若仪器不能达到生产厂家仪器说明书所述的技术指标则可要求退货。评价的内容主要包括精密度、携带污染率、总重复性、线性范围、可比性等内容，一般这些技术指标都在仪器说明书的开始几页。

四 血液分析仪的选择

    根据血液分析仪采用的原理，白细胞分类的项目和测试参数的多少可将血液分析仪分成高、中、低三个档次。高档血液分析仪主要是白细胞五分类仪器，如Coulter MAXM型、CD-3500型、Tech-nicon H.3型和SE-9000型仪器(主要性能见表2)。这类仪器测试参数较多，有利于研究工作的开展，大量较新的实验指标也有助于临床的诊断和治疗，且检测速度快，适合于标本量较多的大型医院或研究机构使用。通过定期进行仪器校准和室内质控工作的开展，可得到较稳定、可靠的仪器测定结果，白细胞五分类也可起到较好的过筛作用，但这类仪器仍然只能起到筛出异常标本的作用，异常标本仍需用显微镜进行复检。另外高档血液分析仪的价格以及仪器配套的试剂、质控物和校准物的价格均较高，一般医院难以承受。再者，对使用高档仪器的操作人员也有较高的要求，否则很难保证能正确地使用和保养仪器。此外有一些高档仪器的国内代理商不具备相应的维修能力，也是一个较突出的问题。

    中档血液分析仪主要是三分类仪器，如Sysmex K-1000型、K-4500型、CD-1600、CD-1700、Coulter JT等(主要生产厂家的仪器性能参数见表3)。这类仪器的参数多为十几项，测试速度也较快，能满足一般医院检验科的工作需要，但这类仪器多是以加入特殊溶血剂后，各类白细胞体积大小不同作为分类依据，不能准确区分嗜酸、嗜碱性细胞，所以当出现白细胞、红细胞及血小板升高或降低，白细胞分类出现异常结果，红细胞及血小板直方图出现异常以及仪器出现任何警示信号时，均应用显微镜复检染色的血片或镜下白细胞分类，现有一些检验科使用血液分析仪后一律不作镜下复检是不正确的。

    低档血液分析仪主要是无分类功能或具有白细胞二分类功能的仪器，白细胞二分类的仪器仅能分出大致的淋巴细胞数，实际上无法满足白细胞分类的需要，所以已不提倡使用该功能，另外这类仪器的检测速度也较慢。对于一些标本量少和资金较少的医院可用这类仪器测定Hb、WBC、PLT、RBC和HCT等参数，但白细胞分类需镜检。只要定期校准仪器，正确地开展室内质控工作，使用低档仪器仍可得到准确的血细胞计数结果。这类仪器生产厂家产品的性能参数见表4。

    对于需要购买血液分析仪的单位，首先要了解如下几个方面的问题: 购买仪器的目的，购置后解决哪些问题？估算标本量、仪器的价格、运行费用、性能参数、保修和维修的情况，设备的安放条件能否满足需要，校准物和质控物以及试剂的来源和价格，人员培训的方式，经济和社会效益等，应结合本单位的财力和科室工作的需要提出初步计划。

    有条件的实验室在选择高档血液分析仪时应特别注意人员的培训和素质的提高，重点培训的人员应具备一定的外语水平和专业知识，仪器操作和计算机应用的能力，科研工作和解决实际工作中问题的能力。此外要从工作需要考虑选购件，避免仪器的多种功能和多项参数得不到开发利用。

     一些实验室在选择中低档仪器，特别是低档仪器时，应选择用户公认质量好、信誉高且具备良好的消耗品提供和维修能力的生产厂家的产品。确定初步计划后，可到有同类仪器的实验室进行了解并详细阅读介绍材料，在比较多种仪器后作出最后决定。

    随着检验科人员素质的不断提高、室内质控的深入开展和对多种检测参数临床意义的进一步研究，血液分析仪在临床诊断和治疗过程中将起到越来越大的作用。随着医院领导和仪器采购部门对仪器使用的进一步认识，将有助于各医院正确地选择适合自己使用的血液分析仪。